无论是癌基因或抑癌基因,其蛋白制裁产物的过量表达可以用相应的抗体应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中的蛋白质产物,也可应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbrnt assay,ELISA)和免疫印迹(western blot)方法检测肿瘤细胞或血清中的蛋白质产物。随着生物学研究的进展,发现在越来越多的蛋白质,包括各种癌基因和抑癌基因产物、细胞因子、受体乃生长因子等在细胞调控中担负重要功能。不少蛋白质已被纯化,大量的单、多克隆抗体被制备,目前几乎所有被克隆的癌基因、抑癌基因都有其相应的抗体问世,其中大多数抗体及试剂盒已商品化,为这些蛋白质产物的测定提代供了十分有利的条件。免疫组化可在组织切片上进行,其特点是在保持组织结构的条件下原位进行分析,特异性和敏感性都较强。ELISA是在细胞悬液中进行,可对特定蛋白质进行定量人析。Westrn blot既或对组织细胞进行分析,也可对释放至血液中的蛋白质进行检测,其敏感性和特性均较强。
新一代测定蛋白质产物的方法 为流式经胞仪(folw Cytometry)测试法,道先标记荧光于相应的抗体蛋白制裁,标记有荧光的抗体蛋白质与特异抗原的细胞结合后,用流式细胞仪对含有不同荧光信号的细胞进行分类、测试。该方法适膈对细胞群体进行分析。更新一代的影响细胞测试示(image cytometry)则可应用特定的波长的光密度进行积分,从而得到特定蛋白质的含量。
在已报道的研究结果中,人类计多肿瘤都存在相关基因蛋白质产物的过量表达,如
组织C-erbB-2表达阳性率可达50%左右,p53阳性也在50%左右,并与肿瘤的组织类型、浸润、转移倾向和预后有关。p53基因表达产物在大多数肿瘤中都过量表达,包括、胆囊癌、、胶质细胞瘤、骨肉瘤、软组织肉瘤等,其阳性率20%-60%之间,对其他基因如myc、ras、bc12、Rb、p21、p27、p57、p16踏它转移抑制基因nm23等表达物搭肿瘤组织中的表达进行了广泛而深入的研究,但不同研究者报道的阳性率之间存在较大的差异,甚至在阳性物质的组织细胞定位也不一致,这可能与多种因素有关,如抗体的选择、病例的选择、技术方法的不同、观察结果中主观因素的影响等。为使应用免疫组织化学方法检测肿瘤基因表达产物的研究更具科学性和应用价值,需要昼快做到免疫组织化学研究标准化和规范化。